福瑞鲤不同胚胎发育时期wnt2和wnt4基因表达特性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

福瑞鲤是以建鲤和黄河鲤为原始亲本，采用完全双列杂交的方法，在pit（passive integrated transponder, 被动集成收发器）标记的辅助下经1代群体选育和连续4代blup（best linearunbiased prediction，最佳线性无偏预测）家系选育而得的水产养殖新品种^[1]，经继续选育，2018年获得了福瑞鲤2号新品种，其生长速度又提高了19.52%，存活率提高了5.26%，体型好（体长体高比为3.63:1）。其获得了较大的遗传进展，生长性状得到显著提高，是农业部“十二五”主推的大宗淡水养殖鱼类新品种，目前已在国内绝大部分地区推广养殖^[2]。但选育获得优良性状的分子机制目前仍不清楚。

关于wnt家族的由来，最早于1982年由nusse等^[3]首次报道，当时称int基因，是由果蝇中的wingless和小鼠中的int两个同源蛋白共同组成，后来将其合称wnt。wnt信号通路最先因其在癌变中的功能被鉴定，这一通路在临床中研究较多。目前已知有3条wnt信号通路：经典wnt通路，非经典wnt细胞极性通路和非经典wnt钙离子通路。所有3条 wnt 信号通路均是由wnt蛋白的配体结合至frizzled家族受体而激活，随后将生物信号传递至胞内的dishevelled蛋白，该通路从果蝇到人类在进化上都高度保守^[4]。wnt功能具多样性,突变导致发育的畸变,从干细胞的丢失到肾和生殖域的缺失，在胚胎发育过程中对细胞的增殖、分化、迁徙、极性和凋亡均起到重要的作用。

2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标

了解福瑞鲤wnt2和wnt4基因在其胚胎发育各个时期的表达特征。

3. 研究的方法与方案

3.1研究方法

1、通过测序获得基因序列，orf阅读框获得保守序列，通过保守序列设计引物。

4. 研究创新点

福瑞鲤是中华人民共和国农业部推广的大宗淡水新品种，具有诸多养殖优势。wnt基因家族作为热门研究基因，目前已经众多学者在多种生物体内被研究，其中也包括鱼类，如黄河鲤、鲶鱼等，但是尚未有学者对福瑞鲤的wnt基因进行研究与分析.

5. 研究计划与进展

5.1研究计划

实验室前期已经取得福瑞鲤不同胚胎发育时期的组织样本，先设计找出合适的wnt2和wnt4的引物，然后通过进行荧光定量pcr测定wnt2和wnt4在福瑞鲤各个胚胎发育时期的表达状况

5.2预期进展