1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
二脂酰甘油酰基转移酶是催化甘油三酯合成最后一步反应的关键酶和限速酶。该酶与体脂的合成,脂肪的储存有着密切的关系。其中dgat2基因与脂肪代谢和脂类在组织中的沉积有很大关系[1]。
lardizabal 等以真菌mtierella ramanniana 为实验材料发现了dgat2酶[2],与dgat1基因相比, dgat2基因在内源性脂肪的合成中的作用更重要。而 dgat1 的作用可能更着重体现在能量代谢调控方面。cases等可以利用发现体外培养的细胞中, 高浓度的 mgcl2对 dgat2 的活性具有抑制作用的特征将dgat2与dgat1区别开[3]。
dgat2基因在调节脂肪代谢、脂类在组织中的沉积及生长发育方面发挥重要作用。dgat2基因对脂肪性状相关性研究dgat2酶在脂质代谢旺盛的组织中的表达水平最高(如肝脏、肾脏、白色脂肪组织)[4]。这意味着它在促进组织甘油三酯合成,甘油脂类的代谢,调节能量代谢,机体的生长发育中起着重要的中心作用。近年来也有不少实验研究证实了这一点。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:
本研究对猪dgat2基因进行生物信息学分析和表达谱分析,旨在初步揭示dgat2基因的理化特性和生物学功能,从而为后续对dgat2基因的深入研究,尤其是其对脂肪性状的影响奠定基础。
3. 研究的方法与方案
研究方法:
利用不同的生物信息学分析软件通过对猪dgat2基因编码蛋白序列进行过理化特性和生物学功能进行分析和预测;对猪dgat2基因编码蛋白的三维结构进行同源建模。通过对6个物种的dgat2基因编码蛋白序列进行同源比对分析,构建系统发育树。组织总rna提取与cdna的合成,引物设计与合成,通过荧光定量pcr反应后对组织表达差异进行分析
4. 研究创新点
目前,对DGAT1的研究要远多于DGAT2,本研究对猪DGAT2基因进行生物信息学分析和表达谱分析,旨在初步揭示DGAT2基因的理化特性和生物学功能,从而为后续对DGAT2基因的深入研究,尤其是其对脂肪性状的影响奠定基础。
5. 研究计划与进展
2018年12月-2019年1月 查阅文献资料、熟悉实验操作
2019年1月-2019年4月 设计引物进行实时荧光定量pcr,生物信息学分析
2019年4月-2019年5月 对试验数据进行统计分析
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