黄精无菌快繁技术的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

黄精(polygonaturmsibiricumredoute)是我国常用的中药材，为百合科黄精属多年生草本植物根茎的总称。《中国药典》2010版一部收藏了滇黄精(polygonatumkingianumcoll.ethemsl.)、黄精(polygonatumsibiricumred.)或多花黄精(polygonatumcyrtonemahua)等3种原生药，按形状不同，习称大黄精、鸡头黄精、姜形黄精[1]。黄精属植物在全球分布很广，大约有40多种，我国约有31种，分布于全国各地[2]，但适应性较差、生境选择性强，主产于河北、内蒙古、陕西等省区。

黄精的活性成分主要为黄精多糖及皂甙等[1]，化学成分主要有:黄精多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、木脂素、维生素和多种对人体有用的氨基酸等化合物[3-5]，具有补脾润肺、益气养阴、强壮筋骨等功效,能治疗体虚乏力、心悸气短、肺燥干咳、病后体虚、风湿痛疼、糖尿病等疾病,。现代药理学研究表明，中药黄精所含的黄精皂苷、糖类、醌类、氨基酸及微量元素等成分，具有免疫激发、增强免疫、延缓衰老、抗病毒等作用[6-15]，在研制新药和开发保健品方面具有广阔的前景。以黄精为主的复方制剂在临床上可用于多种疾病的治疗，如升高白细胞的作用，治疗糖尿病、原发性低血压、冠心病、近视眼、中毒性耳聋、结核及脑功能减退等病症。2000年之后，又有学者对其他方面进行了研究，发现还具有治疗骨结核病[16]、缺血性脑血管病[17]、病毒性角膜炎[18]等。

由于传统的人工栽培方法不仅繁殖系数低，种根茎的用量也大，限制了黄精的生产，随着人们对黄精的需求量的与日俱增，野生资源远远不能满足生产上的需要，还会破坏生态环境和野生资源，所以利用植物组织培养技术建立黄精的快繁体系是生产优质黄精种苗的有效途径。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

1、掌握组织培养技术

2、优化黄精种子愈伤组织组培的最适培养基

3. 研究的方法与方案

研究方法及实验方案：

一、培养基及培养条件

基本培养基为MS,加30g/L蔗糖、6.0g/L琼脂粉和2.0g/L活性炭，pH为5.8，激素配比见表1。照度2000~2400lx，日温25℃，光周期16h。

表1培养基类型

二、黄精种子愈伤组织诱导

取解除休眠后的黄精种子，接种于1～4号培养基上，每组15瓶，每瓶6个左右，进行培养，每个比较3个重复，一段时间后，选出诱导愈伤组织的最适培养基。

三、愈伤组织的继代培养和分化培养及壮苗与生根

将诱导产生的生产状态良好的遇上组织接种于3~6号培养基中，进行继代增殖培养，选出适合愈伤组织增殖和分化的培养基。同样改变激素配比，选择出适合壮苗生根的最适培养基。建立完整的快繁体系。

可行性分析：

在平时的学习过程中，已经十分熟练地掌握了组培技术，对于常用的激素也能做到熟练地运用，在查阅相关的文献后，总结了前人的研究经验，定出了可行的实验方案。

4. 研究创新点

现有的研究表明，已有学者进行黄精组培的研究，但是外植体的选择上都是应用块茎或者叶，用种子进行愈伤组织诱导还没有，本实验的进行可以与其他外植体在组培上进行对比，可以比较选出更有利于建立黄精快繁体系的条件。

5. 研究计划与进展

2013.10--2013.12黄精种子愈伤组织的诱导

2014.01--2014.03愈伤组织继代培养及分化

2014.03-2014.04不定苗的生根培养