茶树中磷酸烯醇式丙酮酸转运子基因的克隆与原核表达开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

磷酸烯醇式丙酮酸/磷酸转运子基因(phosphoenolpyruvate/phosphatetranslocator1,ppt)是细胞质体碳水化合物转运的一个关键基因,在植物莽草酸代谢和脂肪酸生物合成途径中起着重要作用。是异养细胞非绿色质体碳水化合物转运的一个关键转运蛋白，是植物初级代谢和次级代谢体系的重要枢纽[1]。ppt生理功能是将pep从细胞质转运到质体内，在植物体中，质体pep可通过莽草酸代谢途径生成各类芳香族氨基酸或合成蛋白质[2.3]，或作为植物体内其他许多次级代谢物质的底物来源[4],更为重要的是，通过实验证明，通过转运子运至质体的pep是脂肪酸合成代谢中碳源和能量的重要来源[5-8]。pep及其转运相关基因重要功能使其成为近年来的热点研究领域，但在茶树中研究不多。

参考文献：[1]fischerk,kammererb,gutensohnm,etal.anewclassofplastidicphosphatetranslocators:aputativelinkbetweenprimaryandsecondarymetabolismbythephosphoenolpyruvate/phosphateantiporter[j].plantcell,1997,9:453-462

[2]kerbarh o ,bulloch emm ,payne rj ,et al .mechanistic and inhibition studies df chorismate-utilizing enzymes [j].biochemical society transactions ,2005,33:763-766

2. 研究的基本内容和问题

目标：对磷酸烯醇式丙酮酸转运子进行克隆与原核表达

内容：1.提取茶叶中的总rna,并合成cdna.

2.合理设计引物，利用pcr技术获得目的基因

3. 研究的方法与方案

研究方法及实验方案

1.提取茶叶中的mrna，通过反转录pcr技术获得cdna；

2.引物设计

4. 研究创新点

分离和克隆重要的茶树功能基因，对揭示茶树优质、高产和抗逆的分子机理，对采用基因工程技术进行茶树遗传调控等都有重要意义。

5. 研究计划与进展

2013年7月-12月：相关资料收集与相关技术学习；

2014年1月-3月：茶树叶片的采收并进行rna的提取及cdna的合成；

2014年3月-4月：磷酸烯醇式丙酮酸转运子的克隆与表达；