乳化植物甾醇对青脚麻鸡免疫及抗氧化能力的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

植物甾醇（phytosterol，ps）是以环戊烷全氢菲为骨架（又称甾核）的一类物质，在结构上与动物性甾醇如胆甾醇相似，在自然界中以游离态或结合态存在^[1]。所有植物性食物中都含有一定量的植物甾醇，它是植物细胞的重要组成成分，广泛存在于植物的根、茎、叶、果实和种子中^[2]。近年来，有关植物甾醇降低胆固醇、降血脂、抗氧化等功效引起了人们高度重视，对于治疗人类的高血脂等心血管疾病有着重要意义，应用前景广泛。2007 年，植物甾醇获我国农业部颁发的饲料添加剂新产品证书。2010年，我国允许植物甾醇酯作为新资源食品在食品中添加（中华人民共和国卫生部食品安全综合协调与卫生监督局，2010 年第3号新资源食品公告）。

早在20 世纪50 年代，人们就发现发现从膳食中摄入植物甾醇越多，胆固醇的吸收率就越低，血清中的胆固醇水平则越低，近年来植物甾醇的降胆固醇功能再度引起了人们的兴趣。当植物甾醇添加到食品中时，它们会抑制饮食和内源性胆固醇的吸收，从而降低血液中的胆固醇浓度^[3]，补充植物甾醇可显著降低血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯含量^[4]。

植物甾醇具有免疫抗炎功能，效果显著，应用安全。治疗牙周炎诸症牙周宁、治疗口腔溃疡及支气管哮喘谷甾醇软膏与片剂中均采用β–谷甾醇、豆甾醇直接入药。其中由β–谷甾醇与其它药物组成克平喘，具有较强平喘、止咳、祛痰作用，能促进慢性气管炎病变组织修复^[5]，且无传统抗炎退热药物的副作用，因而可作为辅助抗炎症药物而长期使用^[6]。micallef 等指出，植物甾醇可以降低很多炎症指标，减少心血管疾发病率^[7]。植物甾醇由于水溶性较差，机体对其的吸收能力较差，通过乳化植物甾醇可以提高其水溶性，进而促进动物机体吸收^[8]。在日粮中添加乳化植物甾醇可显著提高育肥猪血清总蛋白和球蛋白水平，显著降低白球比，调节机体免疫功能^[9]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

本项目通过研究乳化植物甾醇对青脚麻鸡免疫器官指数、血清生化指标、肠道黏膜抗氧化相关指标的影响，探讨植物甾醇对青脚麻鸡免疫及抗氧化功能的影响，确定其作为饲料添加剂应用于青脚麻鸡上的可行性，并为其在饲料中的合理应用提供参考。

研究内容:

3. 研究的方法与方案

研究方法：

1 试验设计

将240只1日龄雄性青脚麻鸡随机分为5组，每组6重复，每重复8只试验鸡，分别饲喂基础日粮及基础日粮中添加40 mg/kg植物甾醇；200 mg/kg复合乳化剂；40 mg/kg植物甾醇 200 mg/kg复合乳化剂；20 mg/kg植物甾醇 100 mg/kg复合乳化剂。试验期50 d。试验基础日粮参照NRC（1994）营养水平配制成粉料。试验期50天，分为前期(1~21d)和后期（22~50d）两个阶段。

2 样品采集

分别在试验的第21 d及50 d，于各组每个重复随机选取中等大小试验鸡1只，进行采样分析，所选试鸡称重后翅静脉采血约5mL，所采全血用离心管接收，平放静置半小时后，以3000 r/min离心15 min，取出血清分装存管，于-20℃保存备用。待鸡死亡后剖开腹腔，分离胸腺、脾脏和法氏囊，剔除其周围脂肪后称重，计算免疫器官相对重量；分离十二指肠（U型弯曲段）、空肠（十二指肠末至卵黄囊憩室）、回肠（卵黄囊憩室至回盲结合处），刮取十二指肠、空肠、回肠黏膜，置于－20℃待测。

3 指标测定

3.1 免疫器官指数测定

免疫器官指数的计算公式如下：免疫器官指数（g/kg）=器官鲜重（g）/活体重（kg）。

3.2 血清生化指标测定

血清血清总蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、血清谷丙转氨酶（ALT）、血清谷草转氨酶（AST）均采用试剂盒检测（南京建成生物研究），所有操作步骤按照试剂盒说明书进行。

3.3 小肠黏膜抗氧化指标测定

总超氧化物歧化酶（T-SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）均采用试剂盒检测（南京建成生物研究），所有操作步骤按照试剂盒说明书进行。

4 数据处理

试验数据采用Excel 2003进行初步处理后用SPSS 20软件进行统计，用单因子方差（one-Way ANOVA）进行统计分析。试验数据采用平均值±标准误表示，显著性检验采用Duncan氏多重比较法，以P0.05作差异显著性判断标准。

技术路线

可行性分析：

申请人对专业知识掌握牢固，对试验所需的各种生化分析仪器设备已具有相应的操作能力。同时申请人指导老师所在实验室长期从事饲料工艺的研究工作，对饲料添加剂和动物免疫抗氧化功能影响方面的研究，特别是对乳化植物甾醇等相关研究上已有一定的试验积累。指导老师所在实验室具备本试验所需的仪器设备，可确保本试验的顺利进行。

4. 研究创新点

（1）植物甾醇应用于青脚麻鸡饲料中的研究。

（2）对较普通植物甾醇与乳化植物甾醇的作用效果。

5. 研究计划与进展

2018.7-2018.8 查阅文献资料、设计试验方案

2018.9-2018.12 试验动物的饲养与样品的采集

2019.2-2019.4 各项指标的测定、数据处理