山羊睾丸支持细胞的分离培养与鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1课题意义

睾丸支持细胞 (sertoli cell, sc)是曲精细管的重要组成部分，多年来被认为是生精细胞的支架^[1-2]，其能合成与分泌雄激素结合蛋白(androgen binding protein, abp)，为生精细胞提供高浓度的雄激素环境。支持细胞构成血睾屏障，对精子的发生起着营养、支持和保护作用^[3-4]，对睾丸的正常生精，保障种群延续和充分利用优良种公畜的精液具有十分重要的意义。所以，在畜牧业中，通过采集睾丸中最为关键维持微环境的支持细胞作为研究对象，可以为雄性不育的治疗提供新的思路和途径。

1.2研究概况

2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标

本试验以山羊为研究对象，研究山羊睾丸支持细胞的分离纯化，鉴定山羊睾丸支持细胞的纯度，达到调整优化培养方法，保证后续试验的进行的目的。

2.2研究内容

3. 研究的方法与方案

3.1研究方法

3.1.1利用联合酶消化和差异贴壁法进行山羊支持细胞的分离与纯化

3.1.2采用rt-pcr和免疫荧光等方法鉴定山羊睾丸支持细胞

4. 研究创新点

本实验改进消化液的组合、消化时间及纯化方法，结果表明不仅简化了实验步骤、缩短了实验时间，并且分离的山羊睾丸支持细胞活率高、纯度好。

5. 研究计划与进展

本项目预计于2016年2月开始，2016年4月结束。

具体时间安排如下：

前期准备工作：试验技能学习，2015年9月-2016年1月