猪肠球菌的分离鉴定及常用抗菌药物的耐药性分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

肠球菌为革兰氏阳性（g ）球菌，为球形或卵圆形，呈链状排列，广泛分布于自然环境及人和动物消化道内。

肠球菌不但可引起住院病人的腹膜炎、心内膜炎、尿道炎和脑膜炎等，也可引起猪、羊、鸡和鸭等动物的感染 [1]。

其中，猪肠球菌是人类和动物肠道内正常菌群的一部分，猪肠球菌曾应用于食品工程中，用于发酵和防制食物腐烂，还可以利用其作为益生菌在人体和动物体内，用于治疗腹泻、肠应激综合症，降低胆固醇水平，或提高免疫力、改善生长等[2].目前关于肠球菌属耐药性的研究已经十分丰富，肠球菌属细菌对万古霉素敏感或耐药，吡咯烷酮芳胺酶（pyr）、亮氨酸 氨基肽酶（lap）阳性，无动力，大多数菌株10℃、45℃、65g/l nacl中均生长，除乳球菌属与之相似外，与其他兼性厌氧、触酶阴性球菌很容易鉴别 [3]。

2. 研究的基本内容和问题

研究内容：本实验从梅林养殖场进行采样，健康猪采鼻拭子，对病猪进行剖检取组织样。

通过划线接种，革兰染色，生化实验，pcr鉴定等分离出猪肠球菌，同时进行药敏试验，测出不同抗菌药物对各菌株的最小抑菌浓度（mic）,分析细菌的耐药现状。

拟解决关键问题： 了解临床中猪肠球菌耐药现状，根据调查结果为不同猪场提供用药指导。

3. 研究的方法与方案

研究方法：本实验所采的菌株来自于梅林养殖场。

主要的步骤包括： 一、样品采集主要采集健康猪的鼻拭子，每头猪尽量在鼻腔深部不同位置采集三次，采样时要用无菌的pbs浸湿棉签，棉签头剪断置于无菌的2 ml ep管中。

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4. 研究创新点

5. 研究计划与进展

2017.10.18 采样2017.10.19-2017.10.23 样品的扩增以及第一次平板纯化2017.10.24 冻存2018.3.1-2018.3.18复苏，PCR，以及生化鉴定2018.3.20-2018.3.29 MIC测定