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漆酶产生菌的筛选、鉴定及漆酶的纯化、性质研究开题报告

 2022-01-26 10:54:09  

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

漆酶的研究虽然有较长的历史,但很长时期内,集中在体内功能的研究。

随着20世纪70年代前后聚丙烯酞胺凝胶电泳和分子克隆等生物学技术的问世,漆酶的研究也揭开了新的一页。

国外对漆酶分子生物学研究进行的比较深入系统,很多菌种的漆酶基因得到了克隆并进行了分析和鉴定,一些菌种漆酶也实现了异源表达。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目的:1、 筛选获得漆酶产生菌 2、鉴定漆酶产生菌 3、对所产漆酶分离纯化并研究其理化性质。

研究内容:1、筛选能够分泌产生漆酶的菌株,利用生理生化、分子生物学手段对菌种进行鉴定。

2、通过硫酸铵分级沉淀、丙酮沉淀、分子筛层析、离子交换层析等各种分离纯化技术,对漆酶进行分离纯化,并研究其生化性质。

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3. 研究的方法与方案

1、土壤取样 2、目标菌株增殖培养3、分离菌株4、产漆酶菌株的筛选菌株筛选体系的建立5、初筛和复筛6、酶活测定7、漆酶性质的研究 可行性分析:实验可行性分析:1、漆酶来源可以是真菌或细菌,这一点确定无疑,但是需要把最理想的目标菌种筛选出来这是最基础也是最关键的一步,本实验所采用的实验方法均是之前别人使用并且证明确实有检测效果的,非常成熟的方法,因此实验方法上一定没有问题。

2、本项目研究已具备所需科研人员、指导老师及相关的理论依据,其成功后有很好的应用前景,并且科研人员已具备实验所需的实验操作基础及实习基础。

4. 研究创新点

1、漆酶是一类广泛存在于高等和低等生物中的古老酶类,其具有的多酚氧化能力和较宽松的底物特异性使其在造纸、环保、家具制造和食品生产等行业具有引人注酶目的应用前景。

本项目研究致力于筛选产漆酶真核菌株及细菌菌株并研究其基因,创新之处主要体现在建立漆酶真核产生菌及细菌菌株的筛选菌株筛选体系,利用其生理生化性质进行大规模地生产制造应用。

2、 本项目通过对菌株初筛与复筛,能高效的挑取筛选平板上生长较快、菌落规则、颜色明显的单菌落,在选取生长迅速、性状稳定的菌株通过革兰氏染色、biolog系统和165rdna测序等方法对菌株进行鉴定,优化培养出性质稳定高效漆酶。

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5. 研究计划与进展

2015年11月2015年12月 经过指导老师的科学引导,查阅相关文献资料,确定科研项目为漆酶产生菌筛选、鉴定及生理生化性质的研究。

2015年11月2015年12月 通过不同地点取样筛选出产生漆酶的目标菌种。

2016年3月2014年4月 通过培养观察记录不同菌种分泌漆酶的量,以及相应的菌落特点,增殖方式,影响分泌量的不同因素。

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