Wolbachia在叶螨中水平传播可能媒介的初步探究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题的意义：实验室螨虫饲养过程在中，经常在w-群体中检测出w 个体，其原因可能为水平传播、饲养不严格或检测方法误差。

实验室叶螨饲养过程中出现非预期感染现象对于研究工作延续性和可靠性有较大影响。

研究发现76%的节肢动物都感染wolbachia ，其中螨虫广泛感染。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标：人为创造条件，严格控制螨虫饲养及检测过程，记录是否真正发生水平传播，并探究水平传播可能的传播媒介。

2.研究内容：试验需要筛选几个不同地区叶螨的w 和w-纯系。

饲养w 个体，并在可能发生水平传播的短时间内挑取可能的传播媒介进行精细检测，记录是否有wolbachia 存在。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法与试验方案：（1）实验室叶螨种群的饲养：从江苏和河北采集截型叶螨，在实验室条件下进行隔离饲养；（2）pcr技术检测各地理种群的叶螨体内wolbachia的感染情况（主要是检测wsp基因）；（3）从自然种群里筛选100％感染和100％不感染的叶螨，建立实验室w 和w-纯系种群供后续实验；（4） 设计不同密度的w 群体，饲养不同时间，及时切取螨虫生活过的叶片、挑取螨虫的丝、排泄物等进行pcr检测，记录wolbachia是否呈阳性。

用来确定水平传播可能的传播媒介；（5） 饲养w 叶螨一段时间后将叶螨和卵挑走，在原叶片上放置w-个体饲养，一段时间后检测wolbachia感染情况以确定水平传播是否真正出现。

2.可行性分析：本实验室前期对截型叶螨多方面有过详细的研究，具备了实验所需的理论知识和硬件设备，且实验室资金充足，有条件开展一系列的研究。

4. 研究创新点

本试验首次在实验室条件下探究截型叶螨Wolbachia水平传播现象，并用实验室相关仪器试剂寻找水平传播可能的传播媒介。

5. 研究计划与进展

1.研究计划：2013.05-2013.07 叶螨纯系筛选和检测2013.08-2013.09 可能的传播媒介的检测（检测时间段确定、检测方法和待检测媒介的选择、检测结果分析等）2013.10-2013.11 人为创造水平传播条件及后续的检测、结果详细记录2013.12-2014.03 数据统计与分析、论文写作2.预期进展：预期能够按照研究计划逐步完成实验。