南瓜砧木嫁接对Ca(NO3)2胁迫下黄瓜幼苗生长和内源多胺代谢的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、研究意义

设施土壤盐渍化已成为我国设施栽培中最突出的问题，也成为设施蔬菜可持续发展的主要限制因子。黄瓜是我国设施栽培的主要蔬菜作物之一，也是世界性蔬菜。由于黄瓜根系较浅，对盐渍化环境非常敏感，一旦遭受盐胁迫，其植株生长、产量和品质显著下降严重影响了设施黄瓜的可持续发展。为此，本课题以白籽南瓜青砧1号品种为砧木，黄瓜品种津优3号为接穗，研究耐盐砧木嫁接对ca(no3)2胁迫下黄瓜幼苗株高、茎粗、叶面积、干鲜重等指标的影响，明确耐盐砧木可以缓解ca(no3)2胁迫诱导的生长抑制；进一步通过分析黄瓜幼苗内源多胺含量、多胺代谢关键酶活性及其编码基因的表达，阐明南瓜砧木嫁接提高ca(no3)2胁迫下黄瓜幼苗抗性的生理与分子生物学机制。为嫁接提高黄瓜植株耐盐性提供理论依据，完善嫁接提高植物抗逆性的理论。研究结果不仅对于阐明耐盐砧木嫁接黄瓜的耐盐机制、丰富植物的耐盐性研究具有重要的理论价值，而且对于指导耐盐砧木的选育和黄瓜的嫁接生产也具有重要的现实指导意义。

2、国内外研究进展

2. 研究的基本内容和问题

1、研究的目标

以白籽南瓜津优3号品种为砧木，研究耐盐砧木嫁接对ca(no3)2胁迫下黄瓜幼苗株高、茎粗、叶面积、干鲜重等指标的影响，明确耐盐砧木可以缓解ca(no3)2胁迫诱导的生长抑制；进一步通过分析黄瓜幼苗内源多胺含量、多胺代谢关键酶活性及其编码基因的表达，阐明南瓜砧木嫁接提高ca(no3)2胁迫下黄瓜幼苗抗性的生理与分子生物学机制。

2、研究的内容

3. 研究的方法与方案

1、研究方法

（1）生长指标的测定：营养液栽培，ca(no3)2处理7d时,整株取样,称其鲜重;之后放入烘箱中105℃下杀青15min,再在75℃下烘至恒重,称其干重。株高相对生长速率(rgr)按公式:rgr=1hdhdt计算。h为处理前株高,dh/dt为株高瞬间增量。

（2）多胺含量的测定：80mmoll-1ca(no3)2处理后,第1、3、5、7天各取样一次测定多胺含量。取样部位为各处理植株同一部位,去离子水冲洗5遍,吸水纸吸干,称取鲜样0.5g,每处理3次重复。多胺的提取按高洪波等的方法进行,取10μl用日本产shimadzulc-10at型高效液相色谱分析仪测定腐胺(put)、亚精胺(spd)和精胺(spm)峰面积,shimadzuspd-10a检测器。以64%甲醇为流动相,层析柱为反向c18柱(150mm4.6mm),流速0.5mlmin-1,柱温25℃,波长254nm,进样进行测定。以put、spd和spm(sigma公司)做标准曲线,进行put、spd和spm含量的定量分析。

（3）多胺氧化酶活性与相关基因的测定：ca(no3)2处理后,第1、3、5、7天各取样一次测定多胺氧化酶(pao)和二胺氧化酶（dao）活性,称取鲜样0.5g每处理3次重复,参照汪天等方法进行,在波长550nm下测定光吸收的变化值,以每分钟变化0.001为1个酶活性单位(u)。基因表达测定参照实验室实验指南。

4. 研究创新点

1、本实验是在前人研究基础上的拓展和深入，在选题上有一定的创新性。前人的题目多局限于含量的测定，代谢研究的比较少，且大都是茄科植物，而在黄瓜领域的研究则是空白的。

2、本实验能阐明南瓜砧木嫁接提高Ca(NO3)2胁迫下黄瓜幼苗抗性的生理与分子生物学机制，在研究内容上有一定的创新之处，不但可以与嫁接对NaCl胁迫下黄瓜幼苗的多胺含量影响形成对比，也和嫁接对Ca(NO3)2胁迫下茄子幼苗的多胺代谢影响形成比较，丰富了嫁接对盐胁迫下植物多胺代谢影响的内容。

5. 研究计划与进展

2015年3月-2015年5月：查阅相关文献，确定文献综述及毕业论文题目。

2015年6月-2015年8月：分批浸种并播种，获得嫁接所需的砧木和接穗，进行嫁接，管理嫁接成活的植株，得到实验初期材料。

2015年9月-2015年10月：进行胁迫处理，获取实验材料，完成生长指标的测定。