猪链球菌3型的分离鉴定及致病性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

猪链球菌感染是对集约化规模养殖场造成重要影响的一种疾病。

猪链球菌( streptococcus suis)病是由多种不同群的链球菌引起的一种人畜共患的急性、热性传染病[1]，可导致猪败血症肺炎、脑膜炎、关节炎及心内膜炎，世界各地均有发生。

近年来在欧洲、美洲和亚洲多个国家均有猪感染发病且致人死亡的报道[2]。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标明确猪链球菌3型(streptococcus suis 3 , ss3)的致病性,为有效防控其暴发流行提供参考依据。

2.研究内容（1）样品的pcr检测病猪血液提取dna，通过pcr做链球菌3型的分型鉴定。

（2）细菌分离培养与鉴定病猪血液及免疫器官研磨划平板培养，挑取其中的链球菌单菌落，将挑取的单菌落进一步鉴定并纯培养。

3. 研究的方法与方案

研究方案：（1）样品的pcr检测病猪血液提取dna，通过pcr做链球菌3型的分型鉴定。

（2）细菌分离培养与鉴定病猪血液做pcr分型鉴定，检测为链球菌3型阳性后，血平板划线分离挑取链球菌单菌落，再用thb培养基纯培养，将纯培养的菌液进一步做pcr鉴定和镜检，确认为链球菌3型。

（3）致病性实验（攻毒小鼠，测定ld50）将菌液分为中、高、低三个剂量组分别攻毒小鼠，每组10只小鼠，3只小鼠作为空白对照，观察小鼠情况，每两小时观察一次，计算半数致死量。

4. 研究创新点

由于猪链球菌的血清型较多,毒力因子复杂,各血清型之间无交又保护力,因此,目前临床用的常规疫苗不能完全控制猪链球菌病。

目前相关研究以2型为主，猪链球菌3型的研究有较大空缺，本课题主要的特色在于研究猪链球菌3型的致病性，为后续研究提供参考依据。

5. 研究计划与进展

2017.12-2018.01 样品的PCR检测2018.01.03-2018.01.14细菌分离培养与鉴定2018.01.10-2018.01.20 致病性实验 测定LD502018.02.06革兰氏染色2018.02.10-2018.02.14 耐药性检测