一种生物巯化物的比色检测方法及应用开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

生物巯化物包括半胱氨酸（cys）和谷胱甘肽（gsh）等，是一类重要的功能性生物分子，在许多生物过程中起着关键作用。

近几十年来，许多研究表明，生物巯化物的代谢紊乱将导致人类和许多其他动物的机体损伤[1-3]。

具体而言，当其在体内表达量较低时，低水平的生物巯化物可能导致机体生长缓慢，肝损伤，体重减轻及其他不利影响[3-5]；而当其在体内表达量较高时，高水平的生物巯化物则可能会引起帕金森病，阿尔茨海默病和心血管疾病等[6-9]，因此，对体内生物巯化物的定量检测具有重要意义。

2. 研究的基本内容和问题

1. 研究目标本实验基于生物巯化物的可视检测方法条件的优化，进行了牛血清及各细胞系中生物巯化物含量的评估。

2. 研究内容2.1检测方法条件的优化检测不同浓度的生物巯化物（cys或gsh）在不同的tmb与ag 的浓度配比下，结果最为准确和稳定的条件。

2.2牛血采样与牛血清制备从牛场采集牛血浆，使用肝素作为抗凝血剂，离心制备牛血清并储存于-20℃。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法1.1生物样品的制备使用离心的方法进行牛血清的制备，在细胞培养室中进行不同细胞系的复苏、传代培养、裂解取上清液。

1.2比色法检测生物巯化物使用照相机，拍摄可视化结果；紫外可见分光光度法，运用分光光度仪，进行uv-vis光谱测量。

根据分光光度仪测量中所得到的数据和图像，观察各样品在uv-vis光谱中的吸收峰，进行不同细胞系中生物巯化物含量的比对。

4. 研究创新点

生物巯化物在许多生物过程中起着关键作用，其代谢紊乱将导致人类和许多其他动物的损伤。

因此，生物巯化物的检测具有重大的诊断意义。

其他基于色谱法，电泳和荧光技术或纳米材料等的检测方法需要预处理材料或昂贵设备，难以运用到实际中。

5. 研究计划与进展

第一阶段（2017.09-2017.10）熟悉实验室操作，查看相关文献完善实验设计；第二阶段（2017.10-2017.12）优化生物巯化物的可视检测方法的条件；第三阶段（2108.12-2018.01）采集牛血样品，制备血清，完成各品系细胞的复苏与传代培养；第四阶段（2108.01-2018.04）对上一阶段的样品进行裂解，制备样品，运用紫外可见分光光度法检测生物巯化物；第五阶段（2108.04-2018.05）收集数据，分析实验结果，撰写论文。