转录因子WRKY70在生防蜡质芽孢杆菌AR156诱导拟南芥抗病过程中的调控作用研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

通过前人研究得知，促进植物生长的根际细菌蜡质芽孢杆菌ar156通过同时激活水杨酸和茉莉酸/乙烯信号通道诱导拟南芥的系统抗病性，而转录因子是能够结合在某基因上游特异核苷酸序列上的蛋白质，活化后从胞质转位至胞核，通过识别和结合基因启动子区的顺式作用元件，启动和调控基因表达，它被认为在系统抗病过程中起到了举足轻重的作用，但鲜为人知的是，个别转录因子在这个过程中的确切作用，这是一个国内外在新兴研究的方面，并且很有前景。wrky70就是植物特有的一个转录因子，在sa和ja介导的信号通路上起到调控作用，但是wrky70在ar156诱导拟南芥抗病性过程中的作用机理还不可知。本次实验是通过转录因子wrky70的生物学功能的分析，不同突变体和转基因植株中抗病表型、细胞水平和基因表达水平上的差异，解析转录因子wrky70在ar156诱导拟南芥系统抗病性过程中的调控作用，为ar156的实际应用提供理论依据。

参考文献：

[1] jing li, gunter brader, and e. tapio palva.thewrky70 transcription factor: a node of convergence for jasmonate-mediated and salicylate-mediated signals in plant defense[j].the plant cell, vol. 16, 319331.

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标：

解析转录因子wrky70在ar156诱导拟南芥系统抗病性过程中的调控作用

研究的基本内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法：

1、拟南芥野生型col-0和突变体wrky70的诱导抗病表型检测

用dc3000挑战接种以上各种拟南芥植株，五天后统计病害严重度，接种后0d、1d、3d、5d、7d统计植物叶片中病原菌的生长情况；用ar156预处理各植株后再以同样的方法挑战接种dc3000，统计病害严重度和植物叶片中病原菌的生长情况，计算生防效果。

4. 研究创新点

WRKY70是植物特有的一个转录因子，但是未有前人研究其在AR156诱导拟南芥系统抗病性过程中的作用机理，通过研究可以对AR156的实际应用提供理论依据，为生物防治提供理论基础。

5. 研究计划与进展

首先，对拟南芥的野生型和突变体wrky70的诱导抗病表型检测统计生防效果，再通过重组质粒获得转基因植株并且对过表达的植株进行诱导抗病表型检测，然后检测转基因植株中活性氧爆发和胼胝质沉淀，最后检测突变体和转基因过表达植株中的不同信号通路关键基因的表达和WRKY70基因在突变体和转基因过表达植株中的表达情况，综上所述，就是通过抗病表型、细胞水平和基因表达水平来进行研究。